Diabetes mellitus (DM) merupakan penyakit menahun yang ditandai dengan kadar glukosa darah melebihi normal. Penelitian ini dilakukan untuk mendapatkan ekstrak metanol dan fraksi-fraksi daun Vitex pinnata Linn serta uji inhibisi enzim α-glukosidase secara in vitro terhadap ekstrak dan fraksi-fraksi tersebut. Ekstrak metanol, dan fraksi etil asetat mengandung senyawa golongan flavonoid, fenolik, saponin, dan tanin. Fraksi etil asetat menghasilkan nilai IC50 sebesar 13.096,963 ppm dan dikategorikan tidak aktif sebagai antidiabetes ketika dibandingkan dengan glukobay sebagai kontrol yang menghasilkan nilai IC50 sebesar 0,325 ppm.