Protein rekombinan Fim-C S.typhi merupakan protein potensial yang dapat
dijadikan sebagai kandidat vaksin tifus dan memiliki peluang untuk dijadikan
vaksin alternatif dan diproduksi dalam skala besar. Namun, sebelum masuk ke
tahap skala besar diperlukan data optimum skala laboratorium mengenai faktorfaktor
yang berpengaruh pada proses produksi protein Fim-C Salmonella typhi.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi mengenai pengaruh faktor
jumlah sel inang bakteri E.coli BL21 (DE3) pLysS dan waktu overekspresi pada
produksi protein rekombinan Fim-C Salmonella typhi sebagai dasar
pengembangan kandidat vaksin tifus. Proses optimasi overekspresi dilakukan
dengan menambahkan inducer IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) 0,5
mM ke dalam biakan bakteri sejumlah 2%, 4%, dan 6% dengan waktu
overekspresi 4,5, dan 6 jam. Pengukuran konsentrasi sampel ekstrak protein
rekombinan Fim-C dilakukan dengan metode BCA (bicinchoninic acid)
menggunakan BCA Kit Assay Thermo ScientificTM dan diukur pada panjang
gelombang 590 nm menggunakan ELISA reader. Karakterisasi ektrak protein
rekombinan Fim-C dilakukan dengan menggunakan metode SDS-PAGE. Hasil
karakterisasi SDS-PAGE menunjukkan bahwa jumlah sel inang bakteri E.coli
BL21 (DE3) pLysS optimum adalah 4% yang memiliki pita dengan intensitas
lebih tinggi pada ±31 kDa dibandingkan dengan jumlah sel inang bakteri E.coli
2% dan 6%, dan waktu overekspresi optimum adalah 4 jam yang memiliki pita
dengan intensitas lebih tinggi pada pita ukuran ±31 kDa dibandingkan dengan
waktu overekspresi 5 jam dan 6 jam. Hasil penelitian pengaruh jumlah sel inang
bakteri E.coli BL21 (DE3) pLysS dan waktu overekspresi pada produksi protein
rekombinan Fim-C Salmonella typhi memberikan kesimpulan bahwa jumlah sel
bakteri E.coli 4% dan waktu overekspresi 4 jam merupakan kondisi optimum
overekspresi protein Fim-C Salmonella typhi.